بهینه سازی بررسی میزان همانندسازی ویروس کمبود ایمنی انسانی تیپ یک با استفاده از ویریون های با قابلیت یک سیکل تکثیر

سابقه و هدف: ویریون مربوط به ویروس کمبود ایمنی انسانی (hiv) با قابلیت همانندسازی در پژوهش های مربوط به hiv مانند پژوهش هایی با هدف یافتن ترکیبات ضد ویروسhiv جدید مورد نیاز است. در این مطالعه، همانندسازی hiv-1 با استفاده از ویریون های با قابلیت یک سیکل تکثیر (scr) انجام شد. روش بررسی: ویریون scr به وسیله ترانسفکت کردن سلول های hek293t با پلاسمیدهای pmznl4-3 ، pspax2 و pmd2g تولید شد. سلول های هدف hek با مقادیر متفاوت از ویروس scr آلوده شده و میزان p24 مایع رویی سلول با p24 elisa اندازه گیری شد. در ادامه، اثر ضد ویروسی hiv-1 دو داروی شناخته شده ایدز به نامهای نویراپین و ایندیناویر به عنوان کنترل مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها: همانندسازی مناسب ویریون های scr برروی سلول های هدف hek با تیتر شروع کننده ng p24 600 ویروس بود. افزایش p24، 24 ساعت پس از آلودگی قابل سنجش بود و پس از گذشت 48 ساعت به حد اکثر مقدار رسید. غلظتی از داروهای نویراپین و ایندیناویر که 50 و 95 درصد توان بازداری hiv-1 ( ic50و ic95) را داشتند، به ترتیب حدود 50 و 25 نانو مولار بود.نتیجه گیری: میزان اثر ضد ویروسی دو داروی نویراپین و ایندیناویر نشان دهنده دقت مناسب این روش برای سنجش اثر ضد hiv-1 ترکیبات مختلف است. توان همانندسازی یک دوره ای scr hiv باعث افزایش امنیت زیستی روش ابداعی در این مطالعه می باشد.